一、发酵设备
1、实罐灭菌 P4 P5 P7 定义 大罐搅拌轴功率配置注意点 操作过程 判断标准 升温阶段灭菌效应 灭菌过程热量计算例1-3
A.实罐灭菌:
将培养基配置在发酵罐里,用饱和蒸汽直接加热,以达到预定灭菌温度并保温维持一段时间,然后再冷却到发酵温度,这种灭菌过程称作培养基实罐灭菌或称培养基分批灭菌(实消)。
B.大罐搅拌轴功率配置注意点
一般发酵罐上的电机在无特殊要求时,都是按发酵罐通空气状态下的轴功率配置的,这类发酵罐若采用实罐灭菌工艺很好的办法是采用变频调速电机,这样可以既保证实罐灭菌时物料需搅拌的要求,也能保证正常发酵过程搅拌功率的要求。
C.操作过程:Ⅰ—间接加热阶段,培养基由室温加热至80-90℃;Ⅱ—直接蒸汽加热阶段,培养基由80-90 121℃;
Ⅲ—保温阶段,121℃;Ⅳ—冷却阶段,121℃ 培养温度 (见P5 图1-1、1-2)
①把配制好的培养基泵入发酵罐内,密闭发酵罐后,开动搅拌。
②稍开阀门15和9,引入蒸汽进夹套预热培养基至75~90℃,保持夹套压强表的表压50~100kPa.
③培养基预热到75~90℃后,开阀门1和4,排尽蒸汽管道中的冷凝水后,再开阀门2,从空气管道引入蒸汽进发酵罐。关阀门15,并停止搅拌。
④开阀门5,稍开阀门7,排尽蒸汽管道里的冷凝水后,开阀门6,从取样管道引入蒸汽进发酵罐。
⑤开阀门13,稍开阀门11,排尽蒸汽管道里的冷凝水后,开阀门10,由出料管引入蒸汽进发酵罐。
⑥分别稍开阀门16、17、18,排出活蒸汽,调节进汽阀门和排汽阀门的开度使灌压保持在表压105kPa,温度恒定在121℃,维持20~25min。
⑦完成保温时间后,关一路排汽,再关一路进汽,最后三路排汽与三路进汽全部关闭。
⑧开阀门3和2引入无菌空气。
⑨开阀门8,关阀门9,开阀门14,夹套引入冷却水,开搅拌,冷却降温到发酵工艺要求的温度。
注意点:凡与培养基接触的管道都要进整齐,凡不与培养基接触的管道都要排气
D.质量评判标准:
培养基灭菌后达到无菌要求;营养成分破坏少;培养基灭菌后体积与进料体积相符;泡沫少。
E.升温阶段灭菌效应
实罐灭菌的发酵罐体积较大(60-100m3),这样培养基的加热升温阶段时间较长,为了不使培养基受热时间长,营养成分破坏过多,应该考虑加热升温阶段的灭菌效应。反之,发酵罐体积在40m3 以下可以不考虑。
F.*实罐灭菌传热及操作时间的计算:
1.升温阶段传热及操作时间的计算